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稳定的细胞系构建
添加时间:2019-11-25

笔式
引用答案:4楼:最初由prthefuat发表2019-07-1511:43:00
互相交流。
1)
收集病毒后,为什么不将其浓缩,测量滴度并将其用于感染细胞?
2)
当细胞被感染时,药物被破坏。浓度是否经过先前的梯度?
3)
GFP只是一个指标,必须卸载或过表达它的数量。
感谢您的回覆
我想和你谈谈
1)
以前,我们的实验室经过兄弟姐妹的测试,但没有重点关注。
以前使用的通用方法是1 ml +0病毒溶液。
5 ml新鲜培养基和6 pg / ml聚乙烯,我最近购买了一个浓缩试剂盒进行测试。
病毒标题尚未测量。
2)
在使用0之前,检查药物检测浓度。
5,1,3,5ug / ml,最小浓度的细胞在72小时内完全被破坏,首先使用3ug / ml,然后增加到5ug / ml,然后使用8ug / ml一段时间但是细胞不会死,它们会死,绿色仍然处于这种状态。
3)
就个人而言,无论是超载还是过表达,GFP似乎都是相同的,但是在实际情况下,过表达很弱,而偶像相对很强。
这两个基因的表达是否可能受不同启动子控制?
WB发现目标基因,但从未尝试过gfp
4)
该表型是过表达后我的化合物的敏感性增加,这先前已得到临时验证并构建了稳定的细胞系。
这次有什么区别?
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